Laboratorio di Immunometria ed Istochimica

Nel Laboratorio vengono utilizzate varie tecniche per osservare la reazione tra antigene ed anticorpo, con l’obiettivo di determinare la localizzazione e la concentrazione di uno specifico antigene. Il ricercatore viene affiancato e supportato in tutte le fasi del lavoro: nella scelta dell’anticorpo da utilizzare attraverso the Human Protein Atlas, ottimizzazione del processo analitico e validazione del dato. Il dosaggio dell’antigene può essere svolto sia su substrati tissutali/cellulari freschi che FFPE provenienti da studi clinici e pre-clinici, mediante approcci istochimici, enzimochimici, immunologici attraverso reazioni sia nel visibile sia in fluorescenza che in luminescenza.

Staining

Attività e competenze: determinazione della localizzazione e concentrazione di specifici antigeni mediante tecniche avazate

Le indagini vengono condotte mediante:

- Protocolli di immunocitochimica e di immunoistochimica (Avidina-Biotina perossidasi, Alkaline Phosphatase Anti-Alkaline Phosphatase, Perossidasi Anti-Perossidasi)

- Immunofluorescenza diretta ed indiretta su cellule in aderenza e su tessuti sia freschi che inclusi in paraffina

- Estrazione di RNA, DNA e proteine da cellule, tessuti freschi e campioni inclusi in paraffina, sia su porzioni ampie di substrato di partenza sia su porzioni cellulari scarsamente rappresentate nel campione (attraverso microdisettore laser)

- Ottimizzazione Dosaggi ELISA

- FISH (Fluorescence In Situ Hybridization).

- Quantificazione relativa ed assoluta di specifici anticorpi con

strumentazione WES Simple Westerns. Il WES permette di ottenere risultati altamente riproducibili, in un tempo molto ridotto rispetto alle tecniche classiche di Western Blot.